Dieses Porträt war eine der ersten Kommissionen von Holbein als Meistermaler in Basel. Der junge akademische Bonifacius (oder Boniface) Amerbach (1495–1562), ein Druckersohn, wurde ein Freund und Bewunderer von Holbein, wie beide Männer in humanistischen Kreisen in Basel gemischt. Amerbach, der an der Universität Basel das römische Recht lehrte, war auch ein Freund des großen humanistischen Gelehrten Desiderius Erasmus, der ihn zu seinem alleinigen Erbe machte. Er wurde Sammler von Holbeins Kunst und seine Sammlung, erweitert von seinem Sohn Basilius, bildete den Kern des Basilius Kunstmuseums. Das fast quadratische Format des Bildes ist ungewöhnlich. Hinter dem Sitter sind ein Feigenbaum und eine Reihe von schneebedeckten Bergen. Die Inschrift-Tablette auf der linken Seite der Sitter enthält lateinische Verse von Amerbach, die übersetzt: "Obwohl ein gemaltes Gesicht, bin ich nicht zweiter auf das lebendige Gesicht; ich bin der Herr gleich, und ich bin durch richtige Linien unterschieden. Er hat acht Perioden von drei Jahren gelebt, und durch mich zeigt dieses Kunstwerk mit Sorgfalt, was zur Natur gehört." Es folgen die Namen von Amerbach und Holbein und ein genaues Datum.